0 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Рнк вируса гепатита с норма и отклонение особенности диагностики

Вирус гепатита С: кач. РНК обнаружено — что это значит?

Для диагностики ВГC часто используется процедура качественного анализа. Это отдельная методика, дающая весьма точные результаты. На сегодняшний день это один из лучших способов определить наличие (или отсутствие) вируса гепатита C. Анализ может принести два результата. Вот возможные варианты:

  • Вирус гепатита C кач. РНК не обнаружен – что это значит? Ответ прост: в крови нет фрагментов рибонуклеиновой кислоты ВГC. А если гепатит C РНК не обнаружено, то человек здоров;
  • Вирус гепатита С кач. РНК обнаружено – что это значит? В этом случае анализ показал, что человек болен гепатитом C. Или, как минимум, инфицирован. Следовательно, ему требуется лечение.

Здесь обязательно нужно разобраться с сокращением «кач.», имеющемся в диагнозе. С его помощью врачи обозначают, что проводился именно качественный анализ крови. Если этого сокращения нет, то вполне возможно, что диагноз ставился иным способом. В частности, мог использоваться так называемый количественный анализ.

В целом, если гепатит C РНК не обнаружено, что это значит? А значит, что поводов для беспокойства нет. В случае если в крови нет и намека на ВГC, то лечение не требуется: организм справился с болезнью своими силами. Если же фрагменты рибонуклеиновой кислоты ВГC есть, то надо назначать соответствующий курс приема лекарств.

Основные особенности качественного анализа на наличие ВГC в крови

Гепатит C относится к заболеваниям, которые непросто диагностировать. Внешние признаки наличия этого вируса бессистемны, более того, в ряде случаев он себя никак не проявляет. Поэтому очень важно знать, как выявить наличие этой болезни у пациента. Здесь на помощь приходит качественный анализ крови. С его помощью устанавливается наличие или отсутствие фрагментов РНК ВГC в плазме крови.

Качественный анализ на наличие гепатита C проводится по методу полимеразной цепной реакции, сокращенно – ПЦР. Суть метода такова: используются особые ферменты, копирующие фрагменты РНК возбудителя гепатита C (или любого другого заболевания). После получения анализов лаборанты проверяют пробы по базе данных, выявляя разновидность вируса и его концентрацию в крови.

Специалисты называют следующие преимущества данного метода:

  • Точность проверки. При правильном подходе специалисты способны гарантированно определить наличие/отсутствие вируса, равно как и его тип;
  • Быстрое получение результатов анализов. Опытные лаборанты способны представить результат в течение 6-7 часов. Даже с учетом очереди, пациент получает требуемую информацию в кратчайшие сроки;
  • Высокая чувствительность используемого оборудования. То есть, количество единиц вируса на миллилитр крови (МЕ/мл) может быть весьма низким, но анализ все равно выявит наличие инфекции;
  • Низкая цена вопроса. В целом, проводимый анализ мало отличается по цене от других методик. При этом надежность метода качественного анализа (ПЦР) гораздо выше альтернативных вариантов.

Но имеется ряд важных моментов, которые стоит принимать в расчет при проведении анализа. В частности, нужно обращаться только в те клиники, в которых работают действительно хорошие специалисты. Малейшая неточность в работе сделает результат бесполезным. Более того, в этом случае возможно неправильное определение генотипа вируса, либо анализ покажет, что вирус в крови отсутствует. То есть, ценность результатов станет даже отрицательной.

Еще нужно учитывать, что у любого оборудования имеется нижний предел обнаружения вируса. То есть, если инфекция имеется в ничтожно малом количестве, она не будет обнаружена даже с помощью лучших приборов. Поэтому, при наличии подозрений на ВГC, рекомендуется повторить процедуру через определенный срок.

Принципы проведения качественного анализа на ВГC

В целом, к пациенту не имеется особых требований по подготовке к сдаче анализов. Все, что нужно сделать – сдать небольшое количество крови. Строго рекомендуется делать это натощак: в этом случае результаты диагностики будут более точными.

Стоит знать, что качественный анализ по методу ПЦР обычно назначается не сразу. Его рекомендуют проводить в следующих случаях:

  • Обнаружение антител вируса гепатита C в крови пациента.
  • Был обнаружен ВГC, но антитела в крови не имеются.
  • При контроле проводимой противовирусной терапии.

В первых двух случаях качественный анализ назначается после сероконверсии. Если антител нет, но вирус обнаружен, нужно понять: какой именно генотип ВГC присутствует, и почему иммунная система не реагирует. Если есть антитела, то анализ позволяет разобраться: нужно ли лечение, или организм самостоятельно поборол болезнь.

Наконец, при контроле противовирусной терапии анализ делается для проверки эффективности лечения. В частности, метод ПЦР позволит понять, как препараты воздействуют на уже обнаруженный ВГC. Если эффект слабый, то на основе анализов врач решает, нужно ли менять лечение. Стоит запомнить: при контроле противовирусной терапии требуется особо чувствительное оборудование, способное обнаружить РНК гепатита C даже в самой низкой концентрации.

Заключение

Итак, для лучшего запоминания стоит напомнить, что означает тот или иной диагноз, поставленный при качественном анализе. Здесь имеются два варианта:

  • Вирус гепатита C кач. РНК обнаружено – что это значит? Второй вариант, более короткий – гепатит C РНК обнаружено. Это, как его называют, положительный результат. Он означает, что в крови имеются фрагменты рибонуклеиновой кислоты ВГC. И человек инфицирован данным заболеванием.
  • Вирус гепатита C РНК не обнаружен – что это значит? Либо, гепатит C РНК не обнаружено – что это значит, опять же? Это уже отрицательный результат. Анализ не обнаружил в крови фрагментов вируса. А значит, что организм победил инфекцию, и лечение не требуется.

Стоит запомнить: если человек инфицирован, то лечение надо начинать незамедлительно. Любое промедление в этом вопросе может иметь самые тяжелые последствия. И, конечно же, лечиться надо под руководством специалиста.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Современная диагностика гепатитов требует не только выявления причины, но и определения стадии болезни, интенсивности поражения печени. Это необходимо для выбора оптимального варианта лечения, прогноза жизни пациента.

Вирусная нагрузка при гепатите С — один из наиболее информативных способов решения проблемы и ответа на вопросы врача. Он основан на качественном и количественном анализе состава рибонуклеиновых кислот (РНК) вируса в крови больного человека. По полученным показателям можно с достоверностью судить о скорости прогрессирования патологии печени.

Какими методами определяют качественные показатели?

Диагностика вирусного гепатита С проводится по специальным чувствительным тестам. Качественный анализ подтверждает или отрицает наличие вируса в клетках крови больного. Результат дается в форме (+) или (-), «да» или «нет». Указывает на заболевание даже в ранней стадии, но не дает возможности установить интенсивность развития поражения печени, «силу» вируса.

Для проведения достаточно специального экспресс-теста и капли крови. Он позволяет обнаружить антитела к вирусу. Можно приобрести в аптеке. Состоит из комплекта пластиковой полоски, пипетки и игольчатого приспособления для прокола пальца. Кровь забирается пипеткой и помещается в указанный отсек.

Результат получают спустя 10–15 минут. Появление двух полосок говорит «да», одной — «нет». Бывает видно еще одно слабо окрашенное пятно. Его можно расценить, как низкую концентрацию антител.
После получения положительного ответа пациент должен обязательно проходить обследование для точного установления диагноза.

Качественные нарушения в организме при гепатите С подтверждаются клинико-биохимическими исследованиями. О высокой степени поражения печеночных клеток и нарушенных функциях органа говорят следующие результаты:

  • рост СОЭ, гемоглобина;
  • обнаружение уробилина и билирубина в моче;
  • увеличенные в разы трансферазы (аланиновая и аспарагиновая);
  • снижение протромбинового индекса и альбуминов;
  • рост фруктозо-1-фосфатальдолазы Ф-1-ФА, тимоловой пробы; значительное повышение в сыворотке холестерина, триглицеридов, билирубина.

Подтверждением нарушенных функций печени являются ферменты:

  • щелочная фосфатаза;
  • сорбитдегидрогеназа;
  • лактатдегидрогиназа;
  • гаммаглутаминтранспептидаза;
  • гаммаглутамилтрансфераза.

Их изучают в биохимических лабораториях поликлиники. Резкое отклонение состава требуют дополнительных количественных анализов на вирусную нагрузку.

Способы количественной оценки вирусной нагрузки

Вирус гепатита С в отличие от других имеет множество штаммов (генотипов). Выделено более 9 разновидностей, кроме того, каждый еще подразделяется на 3–4 подтипа. Это предоставляет вирусу возможность мутировать.

Весь генетический материал заключен в РНК и находится в ядерных структурах клетки микроорганизма. Количественный метод используется при выявленном бесспорном диагнозе, когда необходимо установить форму болезни и стадию воспалительного процесса.

Подсчет производится по числу клеток вируса в 1 мл крови пациента. Чем больше РНК вируса гепатита С, тем выше активность поражения. Это указывает на угрозу прогрессирования болезни, распространения на здоровые клетки печени. Если численность клеток ненамного выше нормы, то результат все равно считается вирусной нагрузкой.

Для определения количества РНК в «больных» клетках применяют иммунологические методы. Они заключаются в выявлении специфических антител или, наоборот, антигенов при воздействии известным реактивом.

В методике иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотку пациента вводят стандартные антитела, меченные ферментами. Если в крови имеются антигенные структуры вируса гепатита С, то комплексы антиген+антитело изменяют цвет красящего вещества. Количественный подсчет основан на пропорциональном соответствии молекул антигена.

Способ иммуноблоттинга — более чувствителен, сочетает ИФА и предварительное разделение плазмы электрофорезом. Позволяет выявить маркеры гепатита С (антитела и иммуноглобулины). Для исследования используют РНК-блоттинг, белок-блоттинг. Время проведения анализа от трех часов до двух суток.

Радиоиммунологический анализ (РИА) — отличается использованием меченых изотопов для количественной оценки компонентов реакции. Последующая радиометрия выдает окончательную цифру. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — не является иммунологическим. Его значимость трудно переоценить.

Дело в том, что даже при крайне малом содержании специфической генной информации из РНК проводится репликация (копирование) цепи аминокислот, что увеличивает общую массу субстрата. Поэтому исследование генома считается наиболее достоверным. Показывает положительный результат при заражении уже на пятый день, задолго до проявления клинической симптоматики. У здорового человека результат будет отрицательным.

Одна из рекомендаций ВОЗ — троекратное исследование методом ПЦР для выявления РНК вируса гепатита С. Анализ называется «тест 321».

Читать еще:  Что такое фибросканирование печени чем отличается эластография от эластометрии

Эксперты сделали вывод, что только троекратное подтверждение вирусной нагрузки не менее 60 МЕ/мл считается достоверным диагностическим признаком даже на фоне отсутствия других маркеров.

Обычно кровь на ПЦР во время гепатита С сдают в первый раз до лечения, затем после первой, четвертой, двенадцатой и двадцать четвертой недели. Исследование после трех месяцев лечения (12 недель) считается показателем эффективности применяемых препаратов.

Метод раздвоенной ДНК(R-DNK). Считается более дешевым, но менее результативным. Подходит для государственных медицинских учреждений. Позволяет проводить исследование сразу больших коллективов людей. Способен выдать негативный результат при наличии вируса. Более рационально этот метод рекомендуется использовать в качестве дополнительного обследования.

Способ транскрипционной амплификации (ТМА). Наиболее простой и дешевый при достаточной эффективности. Подходит для диагностики гепатита С. Критерием патологии и степень заразности больного при R-DNK считается уровень выше 500 ME, при TMA — от 5 до 10 ME.

Значение концентрации вируса

Чем больше содержание вируса в крови человека, тем он опаснее для окружающих своей заразностью. Эффективность лечения зависит от того, как удается снизить количество вируса. Этот критерий учитывается для прогноза выздоровления.

Содержание возбудителя проверяют в динамике. Если удается уменьшить вирусную нагрузку, то медикаменты считаются эффективными, можно переводить больного на поддерживающие дозировки. При отрицательной динамике анализа необходима корректировка дозы или замена препаратов. Общую оценку состояния пациента дает одновременное сопоставление с результатами клинических и биохимических тестов.

Для первого исследования необходим недельный срок. Динамика повторных анализов проводится спустя месяц. При положительном анализе на антитела у людей без симптомов болезни необходимо повторять исследование вирусной нагрузки ежегодно.

Как проводится трактовка результатов исследований?

По итогам выдаются общие качественные результаты (отрицательный или положительный). При выявлении вируса подробно указывается количественное значение с характеристикой степени зараженности.

Расшифровка вирусной нагрузки при гепатите С проводится в международных единицах (МЕ/мл):

  • высоким считается показатель — свыше 800 000 МЕ/мл;
  • низкой вирусной нагрузкой — меньше 800 000.

Одновременно учитывается в первом случае более 2 млн копий/мл, во втором — менее. При высокой нагрузке говорят об активном воспалительном процессе. В таблице указана более подробная трактовка степени нагрузки.

СтепеньВирусная нагрузка в МЕ/мл крови
низкаяот 600 до 30000
средняяот 30000 до 800000
высокаясвыше 800000

Наиболее частое значение при первичном исследовании на фоне признаков гепатита — примерно 1 100 000 МЕ/мл. Результат считается положительным. Назначается весь комплекс терапии. Если обнаруживают от 400 000 ME и более, считается что вирус не просто присутствует, но и активно размножается, заражая окружающих. Небольшое снижение — показатель благоприятного прогноза на выздоровление.

Отрицательный результат и эффективное лечение подтверждаются полным отсутствием генного материала РНК вируса гепатита С в крови. Его считают достоверным при повторах с большими перерывами. Увеличение вирусной нагрузки после окончания курса лечения и хороших показателей указывает на вероятность рецидива гепатита.

Если в заключении написано: «РНК ниже диапазона измерений», это значит, что генетический материал вируса имеется, но слишком мал для определения конкретного количества данным методом. Подтвердить анализ или опровергнуть можно только с помощью способа полимеразной цепной реакции.

При выявлении положительного анализа на гепатит С у беременной женщины с повышенной вирусной нагрузкой значительно повышается риск заражения плода от больной матери. Приходится решать вопрос о целесообразности сохранения беременности, поскольку применение лекарственных препаратов для лечения может вызвать тяжелые генные мутации у ребенка.

Методы определения РНК вируса гепатита С в крови и особенности ПЦР-анализа

РНК гепатита С – это молекула, содержащая наследственную информацию вируса. Именно ее определяет анализ методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Это ключевой этап диагностики, подтверждающий инфицирование гепатитом. Также по строению РНК определяют генотип HCV. Эти данные нужны для выбора терапии, поскольку некоторые подтипы (3а, 3б) не поддаются традиционному лечению интерфероном. Для достоверного результата потребуется соблюдать правила подготовки к исследованию.

Что такое РНК вируса

РНК, или рибонуклеиновая кислота, – это уникальный генетический материал организма. У вирусных гепатитов С от конструкции РНК зависит устойчивость вируса к разным типам лечения и особенности протекания болезни. Появление в крови фрагментов вирусной РНК значит, что болезнь вступила в острую фазу.

У хронических больных в состоянии ремиссии кровь также содержит РНК гепатита С и антитела к ней, но в меньшем объеме, чем при обострениях. Тем не менее, этого количества вируса все равно достаточно для заражения здоровых людей.

Кому назначают диагностику

Обследование крови на РНК HCV нужно в таких случаях:

  1. При обнаружении антител или повышения печеночных ферментов у человека, считающегося здоровым. Анализы на разные виды гепатита проводят для выявления болезни или ее исключения из списка возможных причин разрушения клеток печени.
  2. Когда лечат уже обнаруженный гепатит для отслеживания эффективности терапии. Контроль за уровнем вирусной РНК в крови своевременно выявит резистентность (устойчивость) к принимаемым лекарствам.
  3. После выздоровления на протяжении года – чтобы вовремя заметить рецидив.

Техника проведения анализа

Методом ПЦР обнаруживают нуклеиновые элементы, входящие в состав белковой оболочки вируса. Полимеразная цепная реакция выявляет:

  • присутствие фрагментов HCV в крови;
  • уровень вирусной нагрузки – количество частиц в миллилитре крови;
  • генотип гепатита.

Важно правильно подготовиться к забору крови из вены для полимеразной реакции, чтобы не было искажений в результате теста. Для этого:

  1. Не употреблять алкоголь, энергетики, жирную и жареную пищу в течение 3 дней до сдачи теста.
  2. Избегать физических и нервных нагрузок за 2-3 дня до анализа.
  3. Отказаться от приема лекарств, а если это невозможно – уведомить врача о принимаемых препаратах.
  4. Не сдавать анализ во время обострения хронических вирусных болезней, а также при ОРВИ.
  5. При беременности и во время менструации предупредить врача о своем состоянии, поскольку гормональные нарушения в этот период вызывают искажения результатов.

Расшифровка

Обработка крови состоит из трех этапов:

  1. Определение РНК вируса гепатита в крови (качественный анализ).
  2. Оценка вирусной нагрузки (количественный анализ). Применяется только при положительном результате первого (когда в материале обнаружено присутствие вируса).
  3. Генотипирование. Его проводят при первом обращении по подозрению на гепатит, а также при низкой эффективности терапии – чтобы выявить мутацию вируса.

При подозрении на ложный результат потребуется повторно пройти обследование через 2 недели.

Качественный анализ

На оборудовании большинства лабораторий гепатит С будет выявлен, если количество частиц больше 50 МЕ/мл (международных единиц на миллилитр крови). Редкие диагностические аппараты способны выявить гепатит при уровне 10 МЕ/мл. При меньшем количестве частиц вируса будет получен ложноотрицательный результат (гепатита C не обнаружено).

Присутствие в крови антител с одновременным отрицательным результатом на тестирование по вирусу – причина пройти повторное обследование через 2 недели. Также можно обратиться в другую лабораторию с более современным оборудованием для диагностики.

Количественный анализ

По результатам количественного теста можно определить, насколько эффективно организм борется с гепатитом С. Этим тестом определяют прогресс болезни, а также действенность терапевтической программы. Уровень вируса в крови определяют в МЕ/мл. В зависимости от результатов пациента относят к одной из пяти групп:

  1. Здоров (вируса не обнаружено).
  2. Минимальный уровень вируса в крови (меньше 180 МЕ/мл. Условно здоров. Иногда может означать ложноположительный результат или скрытое носительство без болезни.
  3. Болен с низкой вирусной нагрузкой (менее 800 тыс. МЕ/мл)
  4. Болен с высокой вирусной нагрузкой (от 800 тыс. до 2.5 млн. МЕ/мл)
  5. Терминальная вирусная нагрузка (более 2,5 млн. МЕ/мл).

От регресса вирусной нагрузки зависит длительность терапии. При слишком медленном падении активности вируса (плохой эффективности терапии) лечение растягивается на полгода и более. Если вирус удастся уничтожить быстрей, срок лечения не превышает 3 месяцев.

Генотипирование

Существует 11 генотипов вируса с различными подтипами. Некоторые из них вводят больных в группу риска по онкологии и фиброзу сильней остальных, другие не поддаются стандартной терапии интерфероном. В идеале генотипирование нужно провести при первичном обнаружении гепатита. Но из-за ограниченности ресурсов к этому анализу прибегают только при отсутствии результатов терапии.

Если есть возможность сделать генотипирование платно, обязательно нужно ею воспользоваться. Этот анализ предотвратит потерю времени на терапию, которая может быть неэффективна при редком субтипе гепатита С.

Как часто нужно сдавать кровь на диагностику

Регулярное обследование на гепатит показано:

  • Людям, которые входят в группу риска из-за профессии или вредных привычек. К первым относятся врачи, ко вторым – наркоманы и люди, практикующие беспорядочные половые связи без использования презервативов.
  • Проходящим терапию – для отслеживания эффективности лечения.
  • Излечившимся от гепатита с целью предотвращения рецидивов.

Кровь на профилактическое обследование у группы риска берут раз 3-6 месяцев. Во время лечения потребуется сдавать анализы чаще – раз в 4-6 недель. При сомнениях в эффективности оборудования той лаборатории, где проводятся анализы, лучше сдать тест в нескольких клиниках одновременно.

РНК вируса гепатита С: норма и отклонение, особенности диагностики

Гепатит С следует отнести к разряду коварных заболеваний, которые могут протекать бессимптомно, но угроза жизни пациента от этого не уменьшается. Для окружающих такой человек превращается в источник инфекции.

Чтобы добиться снижения темпов роста заболеваемости и улучшения здоровья людей, важно периодически контролировать состояние печени. Метод исследования крови на наличие РНК вируса гепатита С признан наиболее достоверным для диагностики и лечения заболевания.

Особенности вирусного гепатита С

Среди воспалительных заболеваний, поражающих печень, особую угрозу для жизни человека представляет гепатит С. Причиной заражения может стать нарушение правил стерильности во время процедуры переливания крови. Намного реже инфицирование происходит в результате полового контакта, а также во время родов, когда болеющая мать заражает новорожденного.

Читать еще:  Причины появления и лечение гепатоза у беременных

Течение гепатита С, наличие которого выявляют анализом на HCV, может быть острым или хроническим. Именно острая форма часто не сигнализирует явными симптомами, а обнаруживают патологию по результатам диагностики других заболеваний.

С переходом острого гепатита в стадию хронической патологии, возможны следующие варианты развития болезни:

  • каждый пятый пациент выздоравливает после вовремя назначенного лечения;
  • часть больных переходит в группу носителей вируса (неактивная форма хронического заболевания);
  • у остальных заболевших прогресс хронической фазы подтверждают признаки поражения печени.

Момент перехода острого этапа в хроническую форму зафиксировать сложно. Причина в постепенном нарастании симптомов медленного поражения печени с отсутствием признаков желтухи.

Популяция вируса скрытно поражает клеточную структуру крови, страдает также печень. Обнаружить фрагменты РНК возбудителя удается только при помощи ПЦР тестирования образцов крови на гепатит С.

Диагностика заболевания

Основной способ инфицирования гепатитом – через кровь. Вирусные агенты, оказавшись в здоровой клетке, вместе с кровотоком достигают печени, где активно размножаются.

Накопление вирионов в зараженных гепатоцитах приводит к разрушению печеночных клеток. Процесс стимулирует выработку антител, которые вступают в борьбу с неповрежденными гепатоцитами, утяжеляя последствия болезни.

Самым надежным способом, позволяющим обнаружить в крови следы вируса, специалисты называют ПЦР анализ. Суть революционного метода полимеразной цепной реакции состоит в обнаружении цепочек вирусных РНК при создании определенной среды, куда помещают взятую на анализ пробу крови. Этапы диагностического процесса:

  1. После получения отобранного биоматериала в нем тиражируют множество копий РНК, принадлежащих вирусу гепатита С.
  2. Использованием многофункциональных тестовых систем с нагреванием и очисткой раствора добиваются необходимого количества копий.
  3. При помощи тестовой диагностики определяют концентрацию в анализируемом образце сформировавшихся генов.

В процессе нескольких этапов диагностики происходит трансформация нуклеотидных цепочек с формированием РНК вируса гепатита С, если порция крови пациента содержала фрагменты возбудителя.

Безоговорочная достоверность ПЦР тестирования объясняется высоким уровнем чувствительности полимеразной реакции, обладающей следующими преимуществами:

  • Для обнаружения HCV достаточно одного генома вируса на весь объем биоптата;
  • Высокая способность к генотипированию для выявления определенного возбудителя;
  • Возможность за одно тестирование обнаружить РНК различных типов вирусов.

Показания для ПЦР-диагностики

ПЦР-диагностика показана пациентам:

  1. при подозрении на воспаление печени без проявления симптомов патологии;
  2. для проведения скрининга во время профилактических мероприятий;
  3. в ходе обследования людей после контакта с инфицированным человеком;
  4. при хроническом гепатите для оценки активности размножающегося вируса;
  5. для выяснения степени эффективности проведенной терапии.

Сдавать анализ на выявление вирусного РНК обязательно должны пациенты, болеющие циррозом. Диагностика ПЦР показана людям, имеющим инфицированных гепатитом С родственников или половых партнеров.

Разновидности тестирования и расшифровка результатов

Хроническую стадию заболевания печени сопровождают признаки фиброза с разрастанием соединительных тканей, что со временем нарушает структуру органа. Если вовремя начать лечение, повышается вероятность обратимости фиброза. Именно для выбора адекватной терапии важен учет результатов диагностики HCV, выполняемой поэтапно:

  • Сначала методом качественного тестирования пытаются обнаружить следы вируса.
  • Результаты количественного теста уточняют концентрацию в пробе вирусной РНК.
  • Методом генотипирования устанавливают, к какому генотипу принадлежит возбудитель.

Ряд медиков считает диагностику на РНК вирусного гепатита обязательной для большинства пациентов, даже не имеющих характерных для патологии симптомов. Появление определенных жалоб уже свидетельствует о запущенном процессе с поражением печени циррозом, некрозом, онкологией.

В домашних условиях можно самостоятельно выполнить несложную диагностику гепатита, пользуясь экспресс-тестом ИФА. Тестовый комплект позволяет определить наличие антител к РНК вируса всего за 15 минут по капле крови. При выявлении антител потребуется дальнейшее обследование.

Задача начального этапа исследования – подтвердить наличие в тестируемом объеме генетических фрагментов HCV, если анализ крови показал наличие у пациента антител, готовых атаковать вирус гепатита С. Интерпретация результатов качественной диагностики имеет две позиции, с их особенностями важно ознакомиться:

  1. «РНК обнаружено». Положительный вариант результата указывает, что биологическая жидкость содержит фрагменты РНК возбудителя гепатита. Интерпретация показателя является подтверждением факта инфицирования: вирус размножается в крови носителя, печень подвергается разрушению.
  2. «РНК не обнаружено». При отрицательном варианте результата сохраняется вероятность малой концентрации вирусной РНК даже при явном отсутствии ее фрагментов. Тест не сможет выявить ничтожную концентрацию вирионов при недавнем заражении либо предшествовавшей противовирусной терапии.

Обнаружения РНК возбудителя по методике качественного тестирования, обеспечивающего 95% точности, достаточно для подтверждения гепатита С. Достоверность качественного этапа анализа ПЦР обеспечивает система с определенным порогом чувствительности (до 500 МЕ/мл).

При низкой виремии (концентрация вируса) потребуется помощь диагностической системы с показателем минимум 50 МЕ/мл. По результатам следующей части анализа определяют концентрацию вирионов в объеме исследуемого биоматериала.

Норма количественного этапа исследования

Следующая ступень тестирования биологического материала заключается в определении количественного состава популяции возбудителя. Тестирование вирусной нагрузки на единицу фиксированного объема крови способствует выяснению степени виремии, а также тяжести заболевания.

Таблица расшифровки числовых обозначений (норма) инфицирования по тесту HCV

Спектр вирусной нагрузки, измеряемый в МЕ/млИнтерпретация показателей, полученных методом полимеразной цепной реакции
Следы РНК вируса гепатита не обнаруженыНулевой показатель признают нормой, а человека – здоровым
Значение 180РНК отсутствует или концентрация вируса ниже порогового диапазона
Меньше 800 тысячОбнаружена низкая степень виремии
Больше 800 тысячОбнаружена виремия высокого уровня
Значение выше 25 млн.Виремия превышает допустимый диапазон измерений

Если результаты качественного анализа с отсутствием следов РНК вируса гепатита подтверждаются количественно на следующем этапе тестирования, то человека действительно можно считать здоровым. В крови полностью отсутствует вирус опасной патологии.

Показатель количественной диагностики, не превышающий 400 тысяч МЕ/мл, указывает на минимальную концентрацию РНК опасного вируса, но не на отсутствие патологии. Нагрузку, превышающую значение 800 тысяч, считают высокой. Но среди медиков нет единого мнения в вопросе жестких рамок, ограничивающих минимальную и максимальную виремию.

Понятие генотипирования вируса HCV

Даже людям, не сталкивавшимся с гепатитом С, необходимо знать, что возбудитель смертельно опасного заболевания имеет несколько генотипов. Благодаря прогрессивным методикам исследований удалось обнаружить 11 генотипов вируса гепатита С, но наиболее распространенных всего 6 видов.

Каждому типу генома, имеющему определенные характеристики, дали буквенное наименование и присвоили статус квазивирусов.

Из-за постоянных мутаций, обеспечивающих способность вируса к выживанию в окружающей среде, иммунная система человека не успевает быстро распознать очередного мутанта, чтобы вырабатывать к нему антитела. Это объясняет высокую опасность заболеть гепатитом С, а вакцинация против печеночной патологии сегодня только на стадии разработки.

Особенности анализа на гепатит

Современные методики лечения новейшими препаратами позволяют не только вылечить патологию, но также избавить организм от вируса. Для этого необходимо установить его генотип и уровень концентрации в организме пациента.

Тест-системы некоторых лабораторий не оснащены соответствующими реагентами. Отсутствие возможности детерминирования субтипов генома приводит к выдаче результатов о невозможности типирования РНК.

В этом случае необходимо подтверждение диагноза методами дополнительных исследований с использованием основных маркеров гепатита. Обнаружение в крови человека иммуноглобулинов М и G сигнализирует о развитии в организме процесса, не характерного для здорового состояния.

Обозначенную ситуацию можно назвать первичным диагнозом, предупреждающим о необходимости комплексного обследования для получения объективной картины развивающегося процесса.

РНК вируса гепатита С: что это такое, анализы на выявление

Определение РНК вируса гепатита С необходимо для установления типа данного заболевания. Зачастую от этого зависит жизнь пациента. Есть масса болезней, протекающих без характерной симптоматики, что мешает врачу быстро поставить правильный диагноз и назначить необходимое лечение. Установление РНК вируса гепатита способствует данному процессу.

Методика выявления заболевания

Сейчас заразиться гепатитом С может каждый. Ранее данное заболевание преобладало среди неблагополучного населения, в частности, наркоманов. Однако в настоящее время оно получило широкое распространение.

Гепатит С передается через кровь. В связи с этим заражение возможно в учреждении здравоохранения, и даже если вы делаете банальный маникюр у профессионального мастера. Инкубационный период составляет 6 месяцев, бессимптомная хроническая форма – до нескольких десятилетий, что приводит к циррозу. Острый гепатит С имеет следующие проявления:

  1. жар;
  2. апатичное состояние, постоянную усталость;
  3. рвоту либо тошноту;
  4. дискомфорт в абдоминальной области и суставах;
  5. желтуху.

Всемирная организация здравоохранения обозначила проблему быстрого темпа заражения данным заболеванием во многих странах мира. В профилактических целях необходимо сдавать анализ крови на гепатит С (или серологический скрининг на антитела ВГС).

Для выявления гепатита С проводится тестирование на рибонуклеиновую кислоту (РНК). Это способствует установлению типа болезни (острой либо хронической).

Опасность гепатита С кроется в его способности к мутированию. С помощью изменения строения гена он может стать невидим для иммунной системы. В этом случае тестирование выявит хронический гепатит С. Пациенту с подобным диагнозом делается биопсия печени (в целях установления серьезности поражения), а также проводится дополнительный тест на установление генотипа вируса.

Что такое РНК вируса гепатита С

Гепатит С представляет собой спектр вирусов, сгруппированных по генотипам и субтипам в структуре РНК. Таким образом, под действием различных веществ разные генотипы будут вести себя индивидуально. Всего известно 11 генотипов, но наиболее распространены 6 из них. Субтипов — около 500, каждый из которых демонстрирует своеобразную чувствительность к веществам.

Анализ РНК вируса гепатита С необходим для определения методики лечения в конкретном случае. От ее выбора зависит степень ее же эффективности. Результат диагностики помогает прогнозировать дальнейшее развитие гепатита С. Иногда биопсия печени производится после анализа РНК.

Генотипы возбудителя распространены в мире неоднородно:

  • 1 и 2 характерны для Западной Европы и Дальнего Востока;
  • 1 – для США;
  • 1b – Японии;
  • 4 – Магриба;
  • 6 – Южной Африки.

В целом генотипы 1, 2, 3 являются наиболее распространенными в мире. Они же характерны для постсоветских стран.

Генотип 1b

Субтип 1b вируса гепатита С распространен в Центральной и Восточной Европе, а также в Азии. Для него характерны:

  • хроническая форма;
  • бессимптомность;
  • провоцирование цирроза, гепатоцеллюлярной карциномы, а также тяжелых внепеченочных осложнений, которые приводят к смертельному исходу;
  • отсутствие результата при терапии интерфероновыми препаратами;
  • лечение по схеме «Даклатасвир»+«Асунапревир» («Софосбувир») позволяет добиться стойкого вирусологического ответа.
Читать еще:  Характеристика вируса и его симптомы

Генотипы 3а и 3в

РНК вируса гепатита С 3а и 3в являются вторыми по распространенности в странах СНГ после 1b. Для них типичны:

  • редкость хронической формы;
  • поражаемость желчных протоков, стеатоз (скопление жировой ткани в печени);
  • редкость цирроза;
  • лечение «Рибавирином» предполагает учет массы тела пациента (при 3a дозировки определяются лечащим врачом в индивидуальном порядке).

Определение РНК вируса гепатита С

Необходимость тестирования определяет гепатолог либо инфекционист. Сама процедура предполагает забор венозной крови у пациента. Перед манипуляцией следует воздержаться от курения, приема алкоголя и наркотических веществ.

Анализ РНК вируса гепатита С позволяет подтвердить или опровергнуть диагноз. Но иногда он не дает определенного результата. Если генотип установить невозможно, это не означает, что пациент на самом деле здоров. Подобный результат может указывать на:

  • нетипичность вируса в данном регионе (тогда берут другие реагенты, чтобы определить реакцию на иные виды гепатита);
  • пониженную концентрацию вирусной РНК в крови (требуется более мощное и чувствительное оборудование).

Иногда у пациента могут обнаруживать несколько видов гепатита С. Тогда после лечения одного типа устраняют другой.

На результат теста непосредственно влияют условия сдачи анализа, а также хранение полученного материала. В связи с этим следует отдавать предпочтение зарекомендовавшим себя лабораториям.

Может быть, в будущем разработают пан-генотипические методы терапии, которые сделают генотипирование не целесообразным. Однако в настоящий момент это — единственный способ установления вида гепатита С.

Норма количественного исследования РНК вируса гепатита С

Нормой при расшифровке анализа на РНК гепатита С считается число, которое количественно нулю.

Анализ должен быть проведен качественно, особенно у пациента, имеющего антитела к вирусу.

  1. Если анализ показал результат менее 400 тыс. МЕ/мл, это означает минимальное наличие вируса, но не его отсутствие.
  2. Показатель более 800 тыс. МЕ/мл считается высоким.

Цена на определение РНК гепатита С

Цена может варьироваться от 500 рублей до 5 000 руб. Это зависит от качества реактивов, используемых в процессе исследования.

За границей известен метод транскрипционной амплификации (ТМА). Он имеет высокую чувствительность в пределах 5–10 МЕ/мл. Однако до России эта методика еще не дошла.

Анализ на РНК вируса гепатита С необходим для скорейшего назначения подходящего лечения. Кроме того, знание о диагнозе поможет уберечь здоровье близких людей пациента. Тест на наличие вируса гепатита, особенно методом ПЦР, является залогом успеха лечения.

РНК вируса гепатита С

«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.

РНК — Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.

Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).

Что это значит?

Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:

Если человек никогда не заражался гепатитом С.

Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.

Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.

Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.

Анализ на РНК вируса гепатита С

Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:

  • разветвленной ДНК (р-ДНК);
  • транскрипционной амплификации (ТМА);
  • полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.

Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.

Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).

Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.

РНК вируса гепатита С: метод ПЦР

Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:

  • высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
  • большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
  • быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.

Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.

ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:

  • Отбора образца биоматериала.
  • Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
  • Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.

После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.

Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.

  • качественной (обнаруживает присутствие вируса),
  • количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
  • генотипической (устанавливает генотип возбудителя).

РНК гепатита С: качественный анализ

Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.

Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».

syringe needle with droplet of blood in front of a finger and on blue bacjground

Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.

РНК гепатита С: количественный анализ

Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:

  • положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
  • установление стадии патологии;
  • определение вирусной нагрузки при гепатитах;
  • выбор комбинации противовирусных препаратов;
  • мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
  • оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.

Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.

Так, показатели (в МЕ/мл):

  • ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
  • от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
  • свыше 8×10*5 — высокой.

Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.

Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.

Гепатит С: анализы и расшифровка

РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.

Ссылка на основную публикацию
ВсеИнструменты
Adblock
detector